מדוע אנו משתמשים בשליטה שלילית ב- PCR?

מדוע אנו משתמשים בשליטה שלילית ב- PCR?
Anonim

תשובה:

ראה למטה

הסבר:

PCR עובד מחוץ לדנ"א תבנית. נניח שאתה בודק את ה- HIV (HIV הוא וירוס רנ"א, אבל כאשר הוא נכנס לתא, הוא הופך לדנ"א …. אז יהיה דנ"א HIV בתא נגוע). פריימרים אתה משתמש יגרום מוצר (amplicon) המתאים חלק DNA ה- HIV. אם אתה רואה את זה amplicon, אז יש לך את רצף ה- HIV הנוכחי ….. אבל אם אין לך שליטה שלילית, ייתכן שיהיה זיהום.

PCR הוא מאוד senstitive. ישנם פתרונות רבים המשמשים PCR (מים, חיץ, dNTPs, אנזים) … וכולם יכולים בקלות לקבל מזוהמים עם דנ"א מדגימות אחרות, או אפילו מן amplicon שנעשה התגובה שעשית אתמול. אז אם יש לך מדגם X של ה- DNA של המטופל ואתה בודק HIV על ידי PCR, פריימרים PCR עשוי להפוך את המוצר של DNA ה- HIV בדגימת ה- DNA של החולה X (אם כי אדם יש HIV), או שהוא עשוי לעשות את זה זיהום. אבל אתה לא יכול לדעת אם זה מזיהום או מאיידס ב- DNA החולים.

אז אתה מפעיל בקרת מים. Tube 1 אתה שם את כל הרכיבים של התגובה, ועל הדנ"א אתה רק להוסיף מים. זוהי שליטה שלילית. שום דבר לא צריך להגביר כאן. ב Tube 2 אתה שם את כל רכיבי התגובה DNA של החולה X. אם אתה מקבל מוצר כאן, (ושום דבר ב Tube 1), המטופל X כנראה יש את ה- DNA DNA ב- DNA שלו. אם אתה מקבל מוצר בשני Tube 1 ו Tube 2, יש לך בעיה זיהום ואתה לא יכול לדעת אם HIV במדגם של המטופל הוא מהמחלה או מזיהום.

אז אתה תמיד מפעיל בקרת מים (מים במקום DNA).