תשובה:
ראה למטה…
הסבר:
אנזימי הגבלה לחתוך רצפים ספציפיים ולכן אנזים הגבלה אותו יש להשתמש כי זה יפיק שברי עם הקצוות דביק משלימים אותו, מה שמאפשר אג"ח ליצור ביניהם.
ישנם אתרי הגבלה תואמים מסוימים שניתן להשתמש בהם יחד. Xho1 ו Sal1 הן דוגמאות. הקצוות הדביקים שלהם תואמים, ולכן הם יכולים להיות ligated יחד. אבל קשירת הורג הן Xho1 ו Sal1 האתר, כך שאתה לא יכול להשתמש בשני אלה לחתוך עם שוב (במקומות קשירת).
אתה יכול גם להשתמש exonuclease או PCR לעשות קצוות דביקים ביותר (5
או 3
overhangs) לתוך אתרים קהה - בדרך זו אתה יכול לקשור לאתר לחתוך קהה - אבל זה יהיה בדרך כלל להרוג את האתר קהה, גם כן.
מה ההבדל בין "להיות" ו "האם"? לדוגמה, איזה מהבאים נכון? "זה חיוני כי הטייסים שלנו תינתן ההכשרה הטובה ביותר." או "זה חיוני כי הטייסים שלנו מקבלים את האימון הטוב ביותר האפשרי."?
ראה הסבר. להיות צורה אינסופית, בעוד הם צורה של האדם השני יחיד וכל האנשים רבים. במשפט לדוגמה הפועל הוא preceeded על ידי הטייסים הנושא, כך טופס אישי ARE נדרש. אינפיניטיבי משמש בעיקר לאחר פעלים כמו במשפט: טייסים חייבים להיות מאוד מיומנים.
PBR322 הוא פלסמיד שיש שני אתרי הגבלה עבור EcoRI בעוד T4 phage DNA יש שלושה אתרי הגבלה על זה. שני DNA אלה טופלו EcoRI מותר לרוץ על ג'ל agarose. איזה סוג של דפוס יושג על הג'ל?
שאלה לא נכונה, T4 יש סביב 40 אתרים עבור EcoR1, לא 3 ... pBR322 יש רק 1 אתר עבור EcoR1, בין הגן AMP גורם התנגדות הגן TET- ... T4 digests: (תודה, ספרינגר Verlag!) אבל אם השאלה שלך היא היפותטית יותר: הן pBR322 והן T4-genomes הם מעגליים, כך: pBR322: 2cuts = 2 שברים, T4: 3 קיצורים = 3 שברים. ריצה על ג'ל agarose היית רואה 2 להקות ב pBR-ליין, 3 להקות בנתיב T4, אונלאס 2 או יותר שברי הם, או קרוב, גודל שווה. . במקרה זה הם נודדים פחות או יותר באותה מהירות ולא ניתן להבדיל ביניהם. יחסית יחס G / C ל A / T יש השפעה גם .... אז בסופו של דבר, אם את שברי בדוגמה זו היפותטי הם שונים בגודל, 2 להקות pBR, 3 עבור T4 ...
למה אתה צריך להשתמש באותו אנזים הגבלה על דנ"א התא על פלסמיד?
הגבלת endonuclease מזהה וחותך את רצף pallindromic זהה ב DNA ו וקטור עקב אשר כאשר הם יהיו מעורבים, הבסיסים המשלימים שלהם יצטרף וזה יהוו את ה- R-DNA, אם שניהם נחתכים עם רי שונים, אז על ערבוב הם רגיל לקשר אחד עם השני כמו בסיסים שלהם לא יתאים.