תשובה:
זה השימוש נוגדנים לזהות חלבונים כי הופרדו על ידי SDS-PAGE ולאחר מכן הועבר קרום.
הסבר:
תאים מכילים תערובת של חלבונים (אלפים רבים) ואלה יכולים להיות מופרדים על ידי SDS-PAGE.
החלבונים מ SDS-PAGE מועברים לאחר מכן, על ידי שימוש של שדה חשמלי, מן הג'ל לקרום המבוצע בדרך כלל ניטרוצלולוזה או פלואוריד polyvinylidene (PVDF).
הממברנה נחקרת עם נוגדן ראשוני ספציפי לחלבון של עניין. נוגדנים משני משמש אז כדי לזהות את הנוגדן העיקרי. הנוגדנים המשניים יכילו סמן שיכול להיות מזוהה על ידי תגובה כימית או לתת הלהקה גלוי על הממברנה, או אות שיכול להיות שנתפסו על ידי מצלמה מיוחדת.
אם נדרש אני יכול להרחיב על תשובה זו בעומק רב כמו ביצעתי כמה מאות כתמים המערבי במהלך הקריירה שלי.
מהו תהליך סופג חום? + דוגמה
התכה של קרח כל תהליך הדורש חום עבור למשל. שינוי פאזה יספוג חום (כלומר אנדותרמי). למשל מוצק -> נוזלי -> גז אם תעבור מכל שלב משמאל לימין מצד אחד, זה יהיה אנדותרמי (כלומר לספוג חום)
מהו כתם immunoassay כתם המערבי?
כתם המערבי (immunonlot חלבון) היא טכניקה אנליטית בשימוש נרחב המשמש לזיהוי חלבונים ספציפיים במדגם של homogenate רקמות או לחלץ. המרכיבים העיקריים הדרושים לביצוע משימה זו הם: הפרדת תערובות חלבון לפי גודל באמצעות ג'ל אלקטרופורזה. העברת יעיל של חלבונים מופרדים לתמיכה מוצקה. את זיהוי ספציפי של חלבון היעד על ידי נוגדנים בהתאמה מתאימים. היכולת של כתמים מערביים כדי להראות בבירור את נוכחותו של חלבון מסוים, הן על ידי גודל דרך מחייב של נוגדנים עושה אותם מתאים גם להערכת רמות של ביטוי חלבון בתאים לניטור שברים במהלך טיהור חלבונים. במקרים רבים משמשים כתמים מערביים בשילוב עם נוגדנים מרכזיים אחרים המבוססים על זיהוי, כגון ELISA או כימיה
מדוע סופג המערבי נקרא כך?
זו בדיחה. היתה טכניקה המציאה בשם "דרום סופג" - שיטה זו פורסמה לראשונה על ידי הביולוג הבריטי אדווין הדרומי. בשיטה שברי DNA מופרדים על ידי אלקטרופורזה, הועבר קרום, ונוכחות זו זוהה על ידי הכלאה של בדיקה. ב חלבונים סופג המערבי מופרדים על ידי אלקטרופורזה ולאחר מכן הועבר קרום, ונוכחותם זוהה עם נוגדנים. כאשר סופג המערבי הומצא הוחלט ללכת עם הנושא "מצפן", וללכת מערבה. יש לציין כי יש גם סופג הצפוני, מזרחי סופג, דרום מערב סופג.