מהו כרומטוגרפיה יון החליפין? + דוגמה

מהו כרומטוגרפיה יון החליפין? + דוגמה
Anonim

תשובה:

זהו תהליך הפרדת חלבונים שונים על בסיס הטעינה שלהם המאפיינים מחייב לחומר.

הסבר:

ב pH שונים חלבונים שונים לשאת חיובים שונים. על ידי הצבת תערובת של חלבונים ב pH להגדיר אתה יכול לקבל תערובת המכילה חלבונים עם מאפייני טעינה שונים.

אם זה תערובת של חלבונים הוא שפך על עמודה המכילה חומר עם מטען על זה הטור יהיה לקשור חלבונים בתוך מטען הפוך.

לאחר מכן תוכל להשתמש בפתרונות שונים המכילים כמויות שונות של יונים כדי elute (unstick) חלבונים מהעמודה.

לדוגמה, נניח שיש לך תערובת של חלבונים שמהם אתה רוצה לטהר חלבון מסוים. אם אתה יודע כי ב pH מסוים חלבון העניין שלך היה חיובי טעון אתה יכול לשפוך את התערובת על עמודה שהכילה חומר טעון שלילי.

כל החלבונים שאינם נושאים מטען, או כאשר הטעינה שלילית יזרמו ישר דרך הטור. לאחר מכן תוכל לשחרר את החלבון טעון חיובי על ידי הצפת הטור עם יונים חיוביים אשר ישלים את המטען השלילי על הטור. תחרות זו היתה אז לגרום החלבון שלך עניין להיות eluted.

הנה דוגמה לכך.

כל מגש מכיל חיץ בריכוז שונה, כפי שניתן לראות בדגימה 175 מ"מ (בפינה השמאלית העליונה) מעט מאוד חלבון אדום / חום יש קשורה קרום טעונה כמו היתה תחרות בין יונים במאגר לבין חלבון עבור אתרי מחייב טעון על הממברנה (יונים במאגר יש "זכה" כי יש יותר מהם ולכן הם מנעו את החלבון מחייב). במדגם בפינה הימנית התחתונה הרבה חלבון יש קשרו את הממברנה כי יש פחות יונים הנוכחי להתחרות על אתרי מחייב.

בסרטון זה ניתן לראות את כרומטוגרפיה החלפת אניון במבצע: