בבדיקת ELISA, מה עושים נוגדנים ראשוניים ונוגדנים משניים?

תשובה:

זה תלוי בסוג של ELayA assay.

הסבר:

אליסה = אנזים מקושר Immunosorbent Assay.

ישנם סוגים שונים של מבחני ELISA. מה שאתה צריך הוא:

• נוגדן עם אנזים מחובר אליו
• אנטיגן אשר נוגדנים נקשר
• המצע של האנזים אשר גורם לתגובה מדידה

ה אנזים המצורפת הנוגדן הוא לעתים קרובות HRP (חזרת peroxidase). HRP יכול להגיב עם מצעים שונים, כי גם משנה צבע או פולט אור, הן מדידות.

התמונה מציגה סקירה כללית של סוגים שונים של מבחני ELISA. אני אסביר איך הם עובדים מתחת.

ישיר ELISA

צלחת מצופה עם אנטיגן (Ag) ו א נוגדן ראשוני עם האנזים הוא הוסיף. כאשר המצע מתווסף, התגובה תתרחש והוא יחסי לכמות נוגדן אינטראקציות אנטיגן.

אליסה עקיפה

שוב, צלחת מצופה עם אנטיגן ו נוגדן ראשוני נקשר לאנטיגן. א נוגדן סודי הוא הוסיף כי נקשר נוגדן הראשון. הנוגדן השני מכיל את האנזים המגיב עם המצע.

כריך אליסה

כאן שניים או שלושה נוגדנים מעורבים. נוגדנים ללכוד מחובר צלחות נקשר אנטיגן. זה ואחריו שלבים כמו גם ישיר (נוגדנים אחד בלבד) או שיטה עקיפה (שני נוגדנים).

אליסה תחרותי

לפעמים נקרא עיכוב ELISA, הוא קצת יותר מסובך. צלחת מצופה עם האנטיגן להיות נחקר. א נוגדן ראשוני עם אנזים מודגרת הראשונה עם מדגם עם ריכוז לא ידוע של אותו אנטיגן. זה לאחר מכן הוסיף את הצלחת, המאפשרים את הנוגדנים כי הם עדיין חופשי להגיב עם האנטיגן על הצלחת. לאחר מתחמי אנטיגן נוגדן של המדגם נשטפים את המצע הוא הוסיף.

כאשר המדגם לא ידוע יש הרבה אנטיגן, יהיו פחות נוגדן חופשי לאגד את הצלחת = נמוך האות.